مجموعة أدوات الكشف عن موت الخلايا المبرمج في TUNEL بخطوة واحدة (مضان أخضر)

تم تطوير كواشف الأجسام المضادة من الدرجة البحثية حصريًا لأبحاث موت الخلايا الأكاديمية، وهي تتطابق تمامًا مع مسارات TUNEL التجريبية لتحديد موت الخلايا المبرمج بدقة.

عندما تخضع الخلايا لموت الخلايا المبرمج، يتم تنشيط بعض نوكليازات الحمض النووي الداخلية، وتقوم هذه النيوكليازات الداخلية بقطع الحمض النووي الجينومي بين النيوكليوسومات. يتم إنتاج شظايا الحمض النووي من 180 bP-200 bP، والتي تتميز بنمط سلم محدد في الفصل الكهربائي لهلام الاغاروز. عندما يتم كسر شريط الحمض النووي المزدوج أو شريط واحد من الجينوم، سيتم إنتاج عدد كبير من النهايات اللزجة 3'-OH، والتي يمكن نقلها إلى نهايات 3'-OH من النوكليوتيدات منقوعة الأكسجين. تحت الإجراء التحفيزي لإنزيم ديوكسينوكليوتيديل ترانسفيراز الطرفي (TdT)، فإنه يتحد مع dUTP المسمى بالفلورسنت، وبالتالي يمكن اكتشافه مباشرة عن طريق الفحص المجهري الفلوري أو قياس التدفق الخلوي. ويسمى الكشف عن الخلايا المبرمجية بوساطة وضع العلامات الطرفية للنيك النوكليوتيديل الطرفي (TUNEL). يرجع ذلك إلى حقيقة أن الخلايا الطبيعية أو المتكاثرة لها بنية DNA سليمة. لا يوجد أي كسر للحمض النووي، لذلك لا يوجد تكوين 3'-OH، ونادرا ما يمكن تلطيخه. يمكن لطريقة Tunel اكتشاف موت الخلايا المبرمج الفردي الكامل. يمكن أن يعكس التلوين الموضعي للنواة أو الجسم المبرمج بدقة الخصائص البيوكيميائية والمورفولوجية النموذجية لموت الخلايا المبرمج، ويمكن اكتشافه يتم استخدام عدد صغير من الخلايا المبرمج على نطاق واسع في دراسة موت الخلايا المبرمج. تحتوي هذه المجموعة على مجموعة واسعة من التطبيقات ويمكن استخدامها للكشف عن التجمد. يمكن أيضًا اكتشاف موت الخلايا المبرمج للخلايا في أقسام البارافين أو الخلايا الملتصقة المزروعة أو الخلايا المعلقة. التفتيش الاختياري قياس الخلايا المبرمج، وليس الخلايا النخرية أو الخلايا التي تحتوي على فواصل الحمض النووي الناتجة عن التشعيع والعلاج الدوائي. تكتشف هذه المجموعة الجزيئات الدقيقة. موت الخلايا المبرمج، وقت قصير، خطوة واحدة فقط من تفاعل الصبغ، يمكن اكتشاف الغسيل بعد الصبغ.

إن توافق العينات المتعددة يجعل كواشف الأجسام المضادة المخبرية قابلة للتكيف بشكل كبير مع مخططات الاختبارات المعملية المتنوعة التي تتراوح من شرائح الأنسجة الثابتة إلى مزارع الخلايا الحية. يتم تصنيع جميع كواشف الأجسام المضادة الداعمة المدرجة في نظام الفحص هذا بشكل صارم لتلبية معايير الأبحاث المعملية ولا يمكن تطبيقها للتشخيص السريري.