تم تطوير كواشف الأجسام المضادة من الدرجة البحثية هذه لتتناسب مع سير عمل الفصل الكهربائي للبروتين في التجارب الأكاديمية، وتعمل بشكل متوافق مع 6 × SDS-PAGE المخزن المؤقت لتحميل البروتين، مما يعمل على تثبيت حالة مستضد البروتين من أجل تجارب تهجين الأجسام المضادة وتحديد هويتها اللاحقة.
يتم تعديل المخزن المؤقت لتحميل البروتين SDS-PAGE (6×) بستة أضعاف المخزن المؤقت لتحميل البروتين المركز المضاف مع صبغة تتبع البروموفينول الزرقاء، والتي تنطبق على الكشف التقليدي SDS-PAGE بما في ذلك أخذ عينات بروتين بياض البيض. تم تركيب هذا المخزن المؤقت مسبقًا باستخدام عامل الاختزال DTT ويحمل رائحة مزعجة طفيفة.
طريقة الاستخدام
قم بإذابة 6 × عازلة التحميل SDS-PAGE في درجة حرارة الغرفة أو في درجة حرارة حمام مائي لا تزيد عن 37 درجة مئوية. نقل المخزن المؤقت إلى درجة حرارة الغرفة للحفظ مباشرة بعد الذوبان بحمام الماء الدافئ؛ لا ينصح بالحضانة لفترة طويلة في الحمام المائي.
مزيج عينة البروتين و6 × تحميل المخزن المؤقت في نسبة حجم عينة البروتين 5 ميكرولتر إلى 1 ميكرولتر 6 × تحميل المخزن المؤقت.
قم بتسخين الخليط في حمام ماء مغلي بدرجة حرارة 95 درجة مئوية إلى 100 درجة مئوية لمدة 10 دقائق لتحقيق تمسخ البروتين بشكل كامل.
تبريد الخليط وصولا إلى درجة حرارة الغرفة، ثم تحميل العينات مباشرة في عينة الآبار من هلام SDS-PAGE.
نهاية الترحيل الكهربائي عندما يهاجر البروموفينول الأزرق إلى قاع الجل في الحالات العامة.
تتلاءم كواشف الأجسام المضادة المعملية بشكل جيد مع مخزن التحميل المؤقت 6× في الاختبارات المعملية اليومية. تحافظ حالة تمسخ الطبيعة المتطابقة على الحواتم البروتينية سليمة، مما يقلل من التقلبات التجريبية لللطخة الغربية الروتينية وغيرها من أعمال التحقق من البروتين المعتمدة على الأجسام المضادة في المختبرات الجزيئية.
ملحوظات
غالبًا ما تظهر مادة لزجة شفافة داخل عينات البروتين أو مخزن التحميل قبل التسخين، والتي تختفي بعد التسخين لمدة 8-10 دقائق. إذا كانت جرعة الخلية/الأنسجة الأولية كبيرة مع وفرة الحمض النووي الجينومي، فقد تبقى مواد لزجة شفافة بعد التسخين لمدة 10 دقائق. يحتاج المستخدمون إلى الغليان لمدة 10 دقائق أخرى، أو إضافة الحجم المناسب من 6 × مخزن تحميل متبوعًا بالغليان لمدة 5 دقائق. يؤدي الغليان الكافي إلى تجريد البروتينات المرتبطة بالحمض النووي الجينومي بالكامل وتكسير الحمض النووي الجينومي الجزئي للتخلص من اللزوجة، دون التدخل في خطوات التحميل اللاحقة.
مطلوب حل كامل ل6 × SDS-PAGE عازلة تحميل البروتين قبل التطبيق؛ ويجب منع دورات التجميد والذوبان المتكررة.
يقتصر هذا المنتج على البحث العلمي المهني فقط. ولا يمكن اعتماده للتشخيص السريري أو علاج الأمراض أو تصنيع الأغذية أو إنتاج الأدوية.
ارتداء معاطف المختبر والقفازات القابل للتصرف طوال العملية لضمان السلامة الشخصية والصحة البدنية.
يتم تصنيع جميع كواشف الأجسام المضادة المتطابقة بشكل صارم لسيناريوهات الأبحاث المعملية فقط. تشكل بيئة تغيير الطبيعة التي يوفرها مخزن التحميل المؤقت هذا نظامًا تجريبيًا مستقرًا مع كواشف الأجسام المضادة، مما يضمن ربط الجسم المضاد بمولد الضد بشكل موثوق بعد نقل الغشاء الكهربي.
Chensi Biotechnology (Kunming) Co., Ltd
الآن الاتصال